产品介绍

HoloMonitor是一款适用于细胞培养箱的无侵入实时活细胞成像系统，采用数字全息影像技术（digital holographic cytometry)，实现真正的无标记，无伤害全自动活细胞成像。该仪器可以长期稳定的在细胞培养箱或者低氧/缺氧小室运行并实时监视细胞的生长及变化，还原最真实的细胞成长状态，在无任何人为干预的情况下获得最可靠的生物学相关数据。

HoloMonitor活细胞成像系统使用数字全息成像技术，以激光为相干光源，利用干涉原理记录物体波前信息的全息图，通过数值重建来获得被测样品的相位和振幅信息完成三维数字重建。真正做到无标记无侵入的同时完成视野内所有细胞的3D成像，无需扫描，无光漂白，即可实现单个细胞和种群的3D成像以及提供完整的细胞形态学参数定量 ，可广泛应用于细胞增殖，分化，迁移，凋亡，毒理等方面研究。

这篇我们总结了HoloMonitor M4 应用于免疫研究方面的文献。
 

1. Downregulation of Vascular Hemeoxygenase-1 Leads to Vasculopathy in Systemic Sclerosis.

期刊：Frontiers in Physiology, 2022.

作者：Ross, Rebecca L et al.

 

研究者发现，根据需要适当调节机体的免疫反应是一种有效的治疗方法，比如阻止病原菌的感染、抑制自身免疫和炎症反应等。目前可用的免疫调节治疗方式主要是用于抗感染，研究者们主要利用天然的免疫调节剂来纠正后天性或者先天性的免疫缺陷，从而定向增强人类机体的免疫效用，在本文中，作者研究了抗氧化酶Hemeoxygenase-1 (HO-1) 的生理作用及其在系统性硬化症 (SSc) 心血管并发症中的相关性。

作者以每孔100，000细胞/孔的密度将人脐静脉内皮细胞（HUVEC）细胞接种到6孔板中，之后对细胞进行浓度为25ng/ml VEGF， 10uMCoPPIX（HO-1激活剂）和1uMZnPPIX（HO-1的抑制剂）的药处理。之后每孔随机选择三个位点，使用HoloMonitor M4进行每隔5分钟为期48小时的监测，来测量HO-1的激活剂和选择性抑制剂对人脐静脉内皮细胞的形态，增殖和运动功能的作用。

结果表明，激活HO-1的活性不会影响其细胞的运动，增值或形态特征，但抑制HO-1的活性显著降低了培养的内皮细胞的细胞增殖和细胞迁移能力（如图）。结果表明HO-1/CO 信号的下调系统性硬化症与系统性硬化症早期发生的病理生理过程，如钙稳态失调、血管生成受损和心律失常之间存在明显联系。
 

2. Mast cell tryptase enhances wound healing by promoting migration in human bronchial epithelial cells.

期刊：Cell Adh Migr, 2021,15(1):202-214

作者：Mogren et al.

上皮损伤和上皮内肥大细胞（MC）增加是哮喘的特征。S. Mogren及其同事旨在确定MC介质类胰蛋白酶和蛋白酶激活受体2（PAR2）在上皮伤口愈合中的作用。研究表明，肥大细胞类胰蛋白酶通过促进人支气管上皮细胞迁移促进伤口愈合。S. Mogren及其同事采用HoloMonitor M4研究类胰蛋白酶和PAR2刺激或抑制剂治疗前后的细胞迁移、伤口愈合间隙闭合率和细胞形态学.
 

3. Immunomodulatory Nanoparticles as Adjuvants and Allergen-delivery System to Human Dendritic Cells: Implications for Specific Immunotherapy.

期刊：Vaccine

作者：S. Broos et al.

 

具有免疫调节特性的新型佐剂和抗原递送系统将过敏性Th2反应转变为Th1或调节性T细胞反应，是过敏原特异性免疫治疗所需的。本研究表明，200 nm大小的可生物降解聚（γ-谷氨酸）（γ-PGA）纳米粒子（NP）是人类单核细胞衍生树突状细胞（MoDCs）的活化剂。γ-PGA NP被未成熟的MoDCs有效内化，强烈刺激趋化因子和炎性细胞因子的产生，以及协同刺激分子和免疫调节介质的上调（涉及低效T细胞启动）。这项研究表明，γ-PGA NP有望作为复杂的佐剂和过敏原传递系统用于过敏原特异性免疫治疗。本研究使用HoloMonitor M2研究细胞形态.

 

4. Essential Oils from Zingiber striolatum Diels Attenuate Inflammatory Response and Oxidative Stress through Regulation of MAPK and NF-Kb signaling Pathways.

期刊：Antioxidants (2021)

作者：Zebin Huang et al.

 

生姜（Z. striolatum）以其药用价值和营养价值而闻名。本研究对中国七个地区的生姜进行了提取和分析来研究生姜精油(EOZS)的抗炎机制。作者从EOZS提取到116 种化合物，其中样品2、4 和 5 显示出最佳的DPPH 自由基清除和一氧化氮抑制能力。作者以5 00000细胞/毫升的密度在六孔板中接种了小鼠巨噬细胞RAW264.7，隔夜培养之后以40ug/ml的浓度用样品2，4，5处理2小时，继而用1ug/ml的LPS继续处理12小时。处理完成之后作者每孔随机选择三个位点用HoloMonitor M4对细胞的形态进行延迟成像。实验结果表明样品2，4，5显著降低了 ROS和促炎细胞因子的生成，并且抑制了小鼠巨噬细胞形态变化、迁移和吞噬能力的产生。在TPA诱导的小鼠中，EOZS通过阻断激活MAPK和NF-κB信号通路来降低耳朵肿胀程度和局部免疫细胞的浸润。该研究揭示了EOZS在调节炎症反应中的抗氧化能力和潜在的分子机制，并提出了EOZS作为天然抗氧化剂和抗炎剂在制药和功能性食品行业中的应用。
 

5. Berberine Maintains the Neutrophil N1 Phenotype to Reverse Cancer Cell Resistance to Doxorubicin

期刊：Frontiers in Pharmacology (2020)

作者: S. Zhang et al.

化疗是癌症患者的主要治疗方法之一。然而一些患者会对化疗药物产生耐药性从而影响治疗效果。其中一种假设是化疗耐药和免疫反应相互关联，但它们之间的关系仍不清楚。在这项研究中，作者探讨了中性粒细胞对化疗耐药性和小檗碱（Berberine）调节的癌细胞对多柔比星 (doxorubicin ，DOX) 敏感性的作用。研究表明单独的多柔比星可诱导 HL-60 细胞分化为 N2 型中性粒细胞并诱导化疗耐药。当 DOX 与小檗碱联合给药时，HL-60 细胞分化为 N2 型中性粒细胞并刺激 HL-60 细胞的免疫清除。在本研究中，作者使用 HoloMonitor M4 通过测量形态和运动的不同表型特征来评估HL-60 细胞分化为 N1 和 N2 型中性粒细胞。
 

6. Unravelling the role of trophoblastic-derived extracellular vesicles in regulatory T cell differentiation.

杂志: International Journal of Molecular Sciences, 2019

作者：AF Kovacs et al

 

AF Kovacs 等人研究了滋养层衍生的细胞外囊泡对调节性 T 细胞的从头分化。作者表明，HSPE1是 Treg 亚型表征的有用标志物，并且在 Treg 细胞体外扩增中具有重要作用。作者将5000个T_reg细胞接种在µ-Slide 8孔独立载玻片上培养30分钟后用HoloMonitor M4以间隔一分钟连续拍摄3个小时来测量T_reg细胞的运动和迁移能力。结果表明HSPE1可以促进Treg细胞的体外扩增。
 

7. TRPM2 Modulates Neutrophil Attraction to Murine Tumor cells by Regulating CXCL2 Expression.

杂志：Cancer Immunology, Immunotherapy, 2018.

作者：M. Gershkovitz et al.

 

体内肿瘤微环境不仅有肿瘤细胞，还包括多种免疫细胞，而最近的研究表明免疫细胞在肿瘤生长和转移中发挥着重要的作用，其中中性粒细胞被证明同时具有促肿瘤和抗肿瘤特性。为了发挥其抗肿瘤作用，中性粒细胞需要向肿瘤细胞迁移并与肿瘤细胞形成物理接触。在这项研究中，研究人员探索了嗜中性粒细胞在与鼠肿瘤细胞共培养中对肿瘤细胞的化学吸引作用（chemoattraction）。作者将TRPM2wt，TRPM2kd 和TRPM2kd-CXCL2 过度表达的4T1癌细胞与中性粒细胞NDN共同培养并用HoloMonitor M4活细胞成像系统的细胞运动和迁移应用进行分析，结果表明TRPM2具有调节中性粒细胞化学引诱物表达的作用，而CXCL2的表达则控制TRPM2的功能从而调节癌细胞对中性粒细胞的趋化效应。
 

8. Cathelicidins Positively Regulate Pancreatic B-cell Functions.

期刊：The FASEB Journal, 2016

作者：J. Sun et al.

 

研究证明Cathelicidins具有调节各种免疫或非免疫宿主细胞反应的作用。这篇文章作者旨在研究cathelicidins是如何由β细胞表达并调节β细胞功能的。作者通过对比不同浓度的Cathelicidins对INS-1832/13细胞活性的影响。结果表明Cathelicidins对β细胞的功能有正向调节的作用，因此Cathelicidins有可能用于干预β细胞功能障碍相关的疾病。

作者用HoloMonitor M4来持续监测INS-1832/13细胞增殖期间的细胞密度。
 

9. Macrophage Polarization and the Effect of Microrna-155 Administered in Water-in-oil-in-water Multiple Emulsion Formulations.

期刊：Journal of Clinical & Cellular Immunology, 2015.

作者：A. Oka et al.

 

肿瘤相关巨噬细胞从主要的 M2 表型重新极化为M1 表型是一种有效的方法达到抗肿瘤免疫和治疗反应。HoloMonitor用于评估将M2 极化巨噬细胞重编程为巨噬细胞-肿瘤共培养系统中的 M1 极化状态。

使用 Holomonitor M4 对共培养细胞进行实时监测显示巨噬细胞的运动性和形态存在差异，mir-155 ME 处理的细胞显示出两种表型之间更大的细胞相互作用。在这项研究中，作者发现 miRNA 155有效地使巨噬细胞重新极化为M1状态，为根除肿瘤提供了潜在的新方法。
 

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